TACE/ADAM17 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-418985-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TACE/ADAM17O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TACE/ADAM17 (m) e o Plasmídeo Double Nickase TACE/ADAM17 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Adam17. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TACE/ADAM17 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-418985-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Adam17 de camundongo codifica a metaloprotease transmembrana TACE/ADAM17, uma das principais “sheddases” responsáveis por liberar ectodomínios solúveis de citocinas, fatores de crescimento e receptores. Ao clivar substratos como o pro‑TNF, ligantes de EGFR e determinadas moléculas de adesão, a ADAM17 conecta a sinalização inflamatória a vias associadas a EGFR/MAPK e NF‑κB, moldando a comunicação celular, a proliferação e as respostas ao estresse. Sua atividade também se cruza com a proteólise intramembrana regulada e com processos de tráfego de membrana que controlam a disponibilidade de receptores e a amplitude da sinalização a jusante. A liberação (“shedding”) desregulada dependente de ADAM17 tem sido implicada em modelos experimentais de doença inflamatória, remodelamento tecidual e redes de sinalização relacionadas ao câncer, o que motiva estudos mecanísticos em sistemas imunes e epiteliais.
TACE/ADAM17 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Adam17 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Adam17. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Adam17. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Adam17 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.