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SYND3/SDC3/Syndecan-3CRISPR激活质粒(h) | sc-402392-ACT | 20 µg | $397.00 |
人类 SDC3 基因编码 syndecan-3(SYND3),这是一种跨膜型硫酸乙酰肝素蛋白聚糖,作为细胞外基质和生长因子配体的共受体,调控细胞黏附、迁移以及受体信号传导。SYND3 通过其糖胺聚糖链以及胞质端的 PDZ 结合基序,影响与细胞骨架组织及 MAPK/PI3K 信号相关的通路,从而塑造神经元发育、轴突导向和突触可塑性。SYND3 还可通过调节细胞表面趋化因子和生长因子的可用性,参与炎症与代谢调控。SDC3 表达失衡或蛋白聚糖信号改变,与神经发育表型、肥胖相关的能量平衡以及肿瘤细胞—微环境相互作用等相关过程存在关联。
SYND3/SDC3/Syndecan-3 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SDC3的表达。
SYND3/SDC3/Syndecan-3 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SDC3基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SDC3转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SYND3/SDC3/Syndecan-3表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SDC3位点,并能够研究内源性位点上依赖于SYND3/SDC3/Syndecan-3的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SDC3表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SYND3/SDC3/Syndecan-3通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。