Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (m) SUZ12: sc-424636-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)SUZ12 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SUZ12 (m) y el plásmido de doble nickasa SUZ12 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Suz12. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SUZ12 Anticuerpo (D-10): sc-271325
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) SUZ12 | sc-424636-NIC | 20 µg | $410.00 |
Suz12 codifica SUZ12, un componente esencial del núcleo del complejo represor Polycomb 2 (PRC2) que coopera con EZH2/EED para depositar la marca represiva de histonas H3K27me3 y establecer el silenciamiento génico heredable. En células de ratón, SUZ12 ayuda a regular programas génicos del desarrollo, el compromiso de linaje y la arquitectura de la cromatina al controlar la represión transcripcional en promotores bivalentes y otros loci diana de Polycomb. Mediante regulación epigenética dependiente de PRC2, SUZ12 influye en procesos como la autorrenovación de células madre, la diferenciación y el control del ciclo celular, y su alteración se asocia con estados transcripcionales desregulados relevantes para la biología del cáncer y fenotipos del desarrollo. Estas funciones hacen de Suz12 un nodo ampliamente utilizado para estudiar la represión mediada por cromatina, la regulación potenciador–promotor y redes de expresión génica específicas de contexto.
SUZ12 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Suz12 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Suz12. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Suz12. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Suz12 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.