SUSD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-412691

概要

SUSD2（sushi domain containing 2）は、細胞外にsushi/CCPドメインをもつ単回膜貫通型タンパク質をコードしており、細胞―細胞および細胞―細胞外マトリックス間相互作用に関与すると考えられています。報告されている機能としては、接着や遊走プログラムの調節、ならびに細胞表面における免疫関連シグナル伝達の制御が挙げられ、上皮組織の構築や間質―腫瘍間クロストークなどの過程にSUSD2が関与することが示唆されています。SUSD2の発現異常は、浸潤性や転移能の変化を含む腫瘍性表現型と、複数の組織で関連づけられています。細胞表面に局在する足場タンパク質として、SUSD2は細胞外微小環境の感知や細胞可塑性に影響するシグナルネットワークの文脈で研究されています。

SUSD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSUSD2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SUSD2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SUSD2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SUSD2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SUSD2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SUSD2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SUSD2の機能に不可欠なSUSD2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SUSD2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SUSD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSUSD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SUSD2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SUSD2 HDRプラスミド（h）および SUSD2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSUSD2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSUSD2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。