![Su[fu] Antibody (F-4) - Western Blotting - Image 55082The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.](https://media.scbt.com/product/sufu-double-nickase-plasmids-m-western-blotting_05_50_b_55082.jpg)
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Su[fu] Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423973-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Su[fu]O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Su[fu] (m) e o Plasmídeo Double Nickase Su[fu] (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Sufu. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Su[fu] Anticorpo (F-4): sc-137014
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Su[fu] Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423973-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Su[fu] Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423973-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Sufu (Suppressor of Fused) codifica um inibidor intracelular essencial da sinalização Hedgehog, que restringe os fatores de transcrição GLI e ajuda a definir limiares para a ativação da via durante o padrão embrionário e a homeostase tecidual. Em células de camundongo, Su[fu] regula o processamento de GLI, sua localização nuclear e o output transcricional a jusante de PTCH1/SMO, conectando-o à sinalização dependente do cílio primário e a programas gênicos do desenvolvimento. A disfunção de SUFU está associada a atividade aberrante da via Hedgehog, implicada em malformações congênitas e processos tumorogênicos, tornando Sufu um alvo amplamente utilizado para estudar o controle da transdução de sinais. Modelos centrados em Sufu também permitem investigar a comunicação cruzada da via com a regulação do ciclo celular, diferenciação e manutenção de células-tronco/progenitoras.
Su[fu] O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Sufu em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Sufu. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Sufu. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Sufu interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.