SSH1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-433087

개요

슬링샷 단백질 인산가수분해효소 1(SSH1)은 cofilin 인산가수분해효소로서, ADF/cofilin을 탈인산화하여 활성화함으로써 액틴 필라멘트의 턴오버를 조절하고 F-액틴 절단과 세포골격 재구성을 촉진한다. 마우스 세포에서 SSH1은 Rho 계열 GTPase와 LIMK 같은 키나아제의 신호를 통합해 라멜리포디아의 역학, 세포 극성, 부착, 방향성 이동을 조절한다. 이러한 액틴 조절 축은 엔도사이토시스, 신경돌기(neurite) 신장, 기계적 신호전달(mechanotransduction)에 영향을 미치며, SSH1 활성을 발달, 면역세포 이동, 조직 재형성과 관련된 과정들과 연결한다. cofilin–LIMK–SSH 신호의 이상 조절은 여러 질환 관련 맥락에서 침습성 행동 및 스트레스 반응의 변화와 연관되어 왔으며, 따라서 Ssh1은 경로를 규명하기 위한 유용한 표적이 된다.

SSH1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ssh1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ssh1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ssh1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SSH1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SSH1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ssh1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SSH1 기능에 중요한 Ssh1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ssh1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SSH1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 SSH1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ssh1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SSH1 HDR 플라스미드 (m) 및 SSH1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ssh1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ssh1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.