SR-2C CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400886

概要

HTR2Cは、ヒトのセロトニン2C受容体（SR-2C）をコードしています。SR-2CはGタンパク質共役受容体で、主にGq/11と共役してホスホリパーゼCシグナル伝達、イノシトール三リン酸（IP3）の産生、細胞内Ca2+動員、プロテインキナーゼC（PKC）の活性化を促進します。SR-2CはMAPK/ERK経路にも関与し、イオンチャネル活性やセカンドメッセンジャー動態への作用を通じて、神経細胞の興奮性およびシナプス伝達を調節します。中枢神経系においてHTR2Cは、食欲、気分、ストレス応答性、内分泌出力の制御に寄与し、セロトニン作動性入力を下流の転写・代謝プログラムと統合します。5-HT2Cシグナルの破綻や、HTR2C内のRNA編集／スプライシング多様性は、研究文献において神経精神疾患および代謝関連の表現型と関連づけられており、経路解析や遺伝子型―表現型研究の機序的ターゲットとしての有用性を支持しています。

SR-2C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるHTR2C遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、HTR2C内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、HTR2Cのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SR-2Cタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SR-2Cシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、HTR2C欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SR-2Cの機能に不可欠なHTR2Cエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、HTR2Cゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SR-2C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSR-2C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、HTR2C遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SR-2C HDRプラスミド（h）および SR-2C HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHTR2Cホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHTR2C標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。