SPPL2b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405646
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SPPL2b O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SPPL2b, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SPPL2b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405646 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SPPL2B codifica a SPPL2b, uma protease aspártica intramembranar da família “signal peptide peptidase–like”, que se localiza nas membranas de endossomos e lisossomos. A SPPL2b contribui para a proteólise intramembranar regulada, moldando a renovação de proteínas de membrana e a geração de fragmentos peptídicos no sistema endo-lisossomal. Por meio dessas atividades, a SPPL2b pode influenciar o tráfego vesicular, o processamento de receptores e a sinalização a jusante associada a vias imunes e inflamatórias. A desregulação da proteólise intramembranar e da função endo-lisossomal é relevante para estudos de neurodegeneração, homeostase de células imunes e controle de qualidade de proteínas de membrana.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SPPL2b (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SPPL2B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SPPL2B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SPPL2B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SPPL2b.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SPPL2B para a investigação da sinalização de SPPL2b, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SPPL2B críticos para a função SPPL2b
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SPPL2B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SPPL2b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SPPL2b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SPPL2B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SPPL2b Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SPPL2b (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SPPL2B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SPPL2B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.