SPLUNC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406336

概要

BPIFA2は、上気道および唾液腺上皮で発現するBPIフォールド含有ファミリーに属する分泌タンパク質SPLUNC2をコードします。SPLUNC2は微生物成分と相互作用し、気道表面液（ASL）の恒常性に影響を与えることで粘膜の自然免疫防御に寄与し、上皮バリア機能と炎症性シグナル伝達プログラムを結び付けます。宿主—微生物相互作用や局所免疫応答の調節に関わることから、BPIFA2は呼吸器の炎症、感染感受性、上皮リモデリングに関する研究でしばしば解析対象となります。BPIFA2/SPLUNC2の発現変化は気道疾患の表現型と関連づけられており、鼻副鼻腔および肺の炎症性病態モデルにおける分子学的指標として用いられています。

SPLUNC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBPIFA2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BPIFA2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BPIFA2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SPLUNC2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SPLUNC2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BPIFA2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SPLUNC2の機能に不可欠なBPIFA2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BPIFA2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SPLUNC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSPLUNC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BPIFA2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SPLUNC2 HDRプラスミド（h）および SPLUNC2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBPIFA2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBPIFA2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。