Plasmide Double Nickase (h) Sp110: sc-405542-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Sp110 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Sp110 Double Nickase (h) et le plasmide Sp110 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SP110. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Sp110 Antibody (B-10): sc-376741
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Sp110 | sc-405542-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Sp110 | sc-405542-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SP110 code pour Sp110, une protéine associée aux corps nucléaires, impliquée dans le contrôle transcriptionnel dépendant de la chromatine et la régulation de l’immunité innée. Sp110 est liée à des programmes géniques induits par l’interféron et à des états d’activation des macrophages, et l’on pense qu’elle module l’architecture nucléaire ainsi que la disponibilité des facteurs de transcription au sein des corps nucléaires PML (leucémie promyélocytaire). Des études génétiques et fonctionnelles associent SP110 à la susceptibilité aux infections mycobactériennes et à des phénotypes immunitaires inflammatoires, soulignant sa pertinence dans les interactions hôte–pathogène. En tant que régulateur de réseaux transcriptionnels immunitaires, SP110 est souvent étudié dans des voies régissant la signalisation des cytokines, la présentation d’antigènes et les réponses antimicrobiennes intrinsèques aux cellules.
Sp110 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SP110 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SP110. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SP110. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SP110.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.