Sox-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401473

Visão geral

SOX1 codifica o fator de transcrição Sox-1, um membro da família SOXB1 que é fortemente expresso no neuroectoderma e em populações de progenitores neurais. Sox-1 liga-se ao DNA por meio do seu domínio HMG box para regular programas gênicos que controlam a especificação neural, a manutenção de progenitores e o momento da diferenciação, interagindo com redes de sinalização do desenvolvimento e de regulação da cromatina. Em vias celulares, SOX1 contribui para circuitos transcricionais que coordenam a neurogênese e a restrição de linhagem, incluindo interação cruzada com processos de padronização associados a Notch, Wnt e SHH. A expressão desregulada de SOX1 tem sido associada a estados de desenvolvimento aberrantes e é estudada em contextos como tumores de linhagem neural e síndromes neurológicas associadas a autoanticorpos, o que a torna um nó útil para pesquisas mecanísticas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sox-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SOX1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SOX1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SOX1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sox-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SOX1 para a investigação da sinalização de Sox-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SOX1 críticos para a função Sox-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SOX1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Sox-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Sox-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SOX1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Sox-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Sox-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SOX1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SOX1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.