SLMAP Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m2): sc-429965-KO-2

Panoramica

Slmap codifica la proteina associata al sarcolemma (SLMAP), una proteina di membrana con ancoraggio C-terminale (tail-anchored) arricchita nelle membrane intracellulari, tra cui il sarcolemma, il reticolo endoplasmatico e l’involucro nucleare. SLMAP partecipa all’organizzazione e al traffico di membrana, alla segnalazione a livello delle giunzioni e all’accoppiamento con il citoscheletro, ed è stata implicata nella regolazione della funzione del centrosoma e della progressione del ciclo cellulare. Nei tessuti eccitabili, SLMAP è collegata a microdomini di canali ionici e di gestione del calcio che sostengono l’attività elettrica e l’omeostasi contrattile. Alterazioni dell’espressione o della localizzazione di SLMAP sono state associate a fenotipi di conduzione cardiaca e a meccanismi legati alla cardiomiopatia, rendendola rilevante per studi sull’architettura di membrana e sull’elettrofisiologia.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SLMAP (m2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Slmap in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Slmap insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Slmap a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SLMAP.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Slmap per lo studio della segnalazione di SLMAP, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Slmap critici per la funzione di SLMAP
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Slmap per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SLMAP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal SLMAP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Slmap. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SLMAP Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR SLMAP (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Slmap per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Slmap definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.