SLMAP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m2): sc-429965-KO-2

概要

Slmap は、サルコレマ関連タンパク質（SLMAP）をコードしており、サルコレマ、小胞体、核膜などの細胞内膜に豊富に存在するテールアンカー型膜タンパク質です。SLMAP は、膜の構築と輸送、接着部位のシグナル伝達、細胞骨格との連結に関与し、中心体機能や細胞周期進行の制御にも関わることが示唆されています。興奮性組織では、SLMAP は電気活動と収縮の恒常性を支えるイオンチャネルおよびカルシウム制御のマイクロドメインと関連しています。SLMAP の発現量や局在の変化は、心臓の伝導表現型や心筋症に関連する機序と結び付けられており、膜アーキテクチャや電気生理を研究する上で重要な分子です。

SLMAP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）は、mouse細胞株におけるSlmap遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Slmap内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Slmapのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SLMAPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SLMAPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Slmap欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SLMAPの機能に不可欠なSlmapエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Slmapゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SLMAP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSLMAP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Slmap遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SLMAP HDRプラスミド（m）および SLMAP HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSlmapホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSlmap標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。