Slit2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401586-LAC

SLIT2 kodiert Slit2, einen sezernierten, mit der extrazellulären Matrix assoziierten Leitfaktor, der an ROBO-Rezeptoren bindet und so die Axonführung, neuronale Migration und gerichtete Zellmotilität reguliert. Über die Neuroentwicklung hinaus beeinflusst die Slit2‑ROBO-Signalgebung die Zytoskelettdynamik über Rho‑Familien‑GTPasen und überschneidet sich mit Signalwegen, die Adhäsion und Chemotaxis steuern; in manchen Kontexten moduliert sie dabei auch die CXCL12/CXCR4‑getriebene Migration. Eine veränderte SLIT2-Expression und epigenetische Stilllegung wurden in zahlreichen Tumorarten beschrieben und werden häufig im Hinblick auf Invasion, Angiogenese und metastatisches Verhalten untersucht. SLIT2 wird außerdem in der Gefäßbiologie sowie bei Entzündungsprozessen erforscht, bei denen Leitfaktoren das Trafficking von Endothel- und Immunzellen prägen.

Slit2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SLIT2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Slit2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SLIT2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Slit2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SLIT2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.