Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) SLC26A3: sc-403891-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SLC26A3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SLC26A3 (h) y el plásmido de doble nickasa SLC26A3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC26A3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SLC26A3 Anticuerpo (H-8): sc-376187
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SLC26A3 | sc-403891-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SLC26A3 | sc-403891-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano SLC26A3 codifica un intercambiador de aniones de membrana (DRA) que media el intercambio electroneutro de cloruro/bicarbonato y contribuye a la absorción de electrolitos por el epitelio intestinal y a la homeostasis del pH luminal. Mediante la regulación del flujo iónico transepitelial, SLC26A3 se vincula con procesos que gobiernan el equilibrio hídrico, la estabilidad de la capa de moco y la función de barrera del epitelio en el tracto gastrointestinal. La alteración de la actividad de SLC26A3 se asocia con la diarrea congénita por cloruro y se ha implicado en mecanismos más amplios de disrregulación epitelial, incluidos contextos inflamatorios y neoplásicos en el colon. Como transportador que influye en microambientes iónicos locales, SLC26A3 es relevante para estudios sobre la diferenciación de enterocitos, redes de transportadores y señalización acoplada a iones.
SLC26A3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC26A3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC26A3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC26A3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC26A3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.