serum reponse factor /SRF Lentiviral Activation Particles (m): sc-423154-LAC

Mouse Srf kodiert den Serum Response Factor (SRF), einen MADS-Box-Transkriptionsfaktor, der an Serum-Response-Elemente bindet, um die Expression von Immediate-Early-Genen mit der Zytoskelettdynamik zu koordinieren. SRF integriert Signale aus RhoA‑abhängigem Aktin-Remodeling sowie aus MAPK/ERK-Signalwegen und reguliert dadurch Programme, die Proliferation, Migration, Differenzierung und Stressantworten steuern. Über Interaktionen mit Kofaktoren wie Myocardin und MRTFs moduliert SRF Gen-Netzwerke der glatten Muskulatur und des Herzens ebenso wie aktivitätsabhängige Transkription in Neuronen. Eine dysregulierte SRF-Signalgebung wurde mit aberrantem Remodeling und Wachstumsphänotypen in kardiovaskulären und neuromuskulären Kontexten in Verbindung gebracht, was SRF zu einem nützlichen Knotenpunkt für mechanistische Studien der transkriptionellen Kontrolle in krankheitsrelevanten Signalwegen macht.

serum reponse factor /SRF Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Srf-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

serum reponse factor /SRF Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Srf-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen serum reponse factor /SRF-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Srf-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.