serum reponse factor /SRF Lentiviral Activation Particles (h): sc-400470-LAC

ヒトSRF（serum response factor）はMADSボックス型の転写因子で、CArGボックスモチーフに結合して、即時早期遺伝子の発現および細胞骨格関連遺伝子プログラムを制御する。SRFは、三者複合体因子（ternary complex factors）を介したMAPK/ERKからのシグナルと、ミオカルジン関連転写因子（myocardin-related transcription factors）を介したRhoA–アクチン動態からのシグナルを統合し、増殖、分化、運動性、ストレス応答を協調的に調節する。SRFにより制御される転写は、平滑筋および心筋の遺伝子ネットワーク、ならびに細胞接着と遊走を形作るアクチン再構築経路の中核を担う。SRF活性および上流シグナルの破綻は、がん生物学における異常増殖や浸潤性表現型、さらに心血管疾患や線維化関連の病態における病的リモデリングと関連づけられている。

serum reponse factor /SRF レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なSRFの発現上昇を可能にします。

serum reponse factor /SRF レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、SRF転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性serum reponse factor /SRFの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のSRFゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。