SerpinA6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407031

Descripción general

SERPINA6 codifica SerpinA6, también conocida como globulina fijadora de corticosteroides, un miembro secretado de la familia de inhibidores de proteasas de serina que regula principalmente la biodisponibilidad sistémica de glucocorticoides al unirse al cortisol y transportarlo en el plasma. Al amortiguar los niveles de cortisol libre, SerpinA6 influye en la señalización del receptor de glucocorticoides y en los programas transcripcionales posteriores que moldean el metabolismo, las respuestas inmunitarias y la fisiología del estrés. La alteración de la expresión de SERPINA6 o la variación genética se han asociado con una actividad desregulada del eje hipotalámico‑hipofisario‑suprarrenal y con fenotipos relacionados con el cortisol, incluida la susceptibilidad a rasgos metabólicos e inflamatorios. En sistemas experimentales, SERPINA6 ofrece una herramienta para analizar la comunicación cruzada de la señalización endocrina con las vías secretoras hepáticas y la homeostasis de proteínas extracelulares.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SerpinA6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SERPINA6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SERPINA6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SERPINA6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SerpinA6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SERPINA6 para la investigación de la señalización de SerpinA6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SERPINA6 críticos para la función de SerpinA6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SERPINA6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SerpinA6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SerpinA6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SERPINA6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SerpinA6 (h) y el plásmido HDR SerpinA6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SERPINA6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SERPINA6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.