SerpinA6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407031

概要

SERPINA6は、コルチコステロイド結合グロブリン（corticosteroid-binding globulin）としても知られるSerpinA6をコードしています。SerpinA6は分泌型のセリンプロテアーゼ阻害因子ファミリーの一員で、血漿中でコルチゾールに結合して輸送することで、全身性のグルココルチコイドの生体内利用能を主に調節します。遊離コルチゾール濃度を緩衝することにより、SerpinA6はグルココルチコイド受容体シグナル伝達と、その下流の転写プログラムに影響を与え、代謝、免疫応答、ストレス生理を形作ります。SERPINA6の発現変化や遺伝的多型は、視床下部—下垂体—副腎（HPA）軸活動の調節異常や、代謝・炎症関連形質への感受性を含むコルチゾール関連表現型と関連づけられています。実験系においてSERPINA6は、内分泌シグナルのクロストークを肝臓の分泌経路や細胞外タンパク質の恒常性と結び付けて解析するための手がかりとなります。

SerpinA6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSERPINA6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SERPINA6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SERPINA6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SerpinA6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SerpinA6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SERPINA6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SerpinA6の機能に不可欠なSERPINA6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SERPINA6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SerpinA6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSerpinA6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SERPINA6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SerpinA6 HDRプラスミド（h）および SerpinA6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSERPINA6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSERPINA6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。