Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SERCA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400417-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SERCA2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SERCA2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SERCA2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATP2A2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SERCA2 Anticorpo (F-1): sc-376235
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SERCA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400417-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SERCA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400417-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP2A2 codifica a Ca2+ ATPase do retículo sarco/endoplasmático humano SERCA2, uma ATPase do tipo P que transporta Ca2+ do citosol para o lúmen do RE, a fim de manter o armazenamento de Ca2+ e a homeostase da sinalização. Ao moldar a carga de Ca2+ do RE, a SERCA2 regula o acoplamento excitação–contração, a dinâmica da entrada de Ca2+ operada por estoques (SOCE) e o controle dependente de Ca2+ do dobramento proteico, da secreção e de vias de sobrevivência celular ligadas às respostas ao estresse do RE. A perturbação de ATP2A2 desorganiza as oscilações intracelulares de Ca2+ e pode alterar redes de sinalização a jusante, incluindo as vias calcineurina/NFAT e a resposta a proteínas mal dobradas (UPR). Variações em ATP2A2 estão associadas à doença de Darier e têm sido implicadas em contextos em que o manuseio de Ca2+ pelo RE influencia a fisiologia cardíaca e epitelial, sustentando estudos mecanísticos de sinalização por Ca2+ e proteostase.
SERCA2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATP2A2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATP2A2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATP2A2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATP2A2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.