Septin 2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421849

개요

Mouse Sept2는 세포 골격의 핵심 GTP 결합 단백질인 셉틴 2(septin 2)를 암호화하며, 이 단백질은 서로 다른 셉틴들이 함께 모인 이종 올리고머 형태의 셉틴 필라멘트와 고리 모양 구조로 조립되어 세포 구조를 조직합니다. 셉틴 2는 세포질분열, 막 재형성, 소포 수송을 조절하고, 액틴 및 미세소관 네트워크와 상호작용하여 극성 성장을 지원하고 세포 내 구획화를 돕습니다. Sept2 의존적 스캐폴딩(발판) 기능은 미드바디 형성, 신경돌기 성장, 상피 장벽 조직화 같은 과정에 기여하며, 셉틴의 동역학을 세포 분열과 형태형성(morphogenesis)을 조절하는 경로와 연결합니다. 셉틴 조직의 조절 이상은 비정상적인 유사분열 및 변화된 세포골격 신호전달과 연관되어 왔으며, 따라서 Sept2는 실험 모델에서 종양 생물학 및 신경발달 표현형과 관련된 기전을 연구하는 데 유용한 표적(노드)로 활용됩니다.

Septin 2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Sept2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Sept2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Sept2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Septin 2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Septin 2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Sept2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Septin 2 기능에 중요한 Sept2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Sept2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Septin 2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Septin 2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Sept2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Septin 2 HDR 플라스미드 (m) 및 Septin 2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Sept2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Sept2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.