SEMA5A Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422885-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SEMA5AO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SEMA5A (m) e o Plasmídeo Double Nickase SEMA5A (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Sema5a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SEMA5A Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422885-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SEMA5A Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-422885-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Sema5a de camundongo codifica a pista de orientação transmembranar SEMA5A, um membro da família das semaforinas que modula a navegação axonal, o padrão de dendritos e a motilidade celular por meio de interações com receptores que influenciam a remodelação do citoesqueleto e a dinâmica de adesão. A sinalização de SEMA5A se integra a vias que controlam a orientação do cone de crescimento e as interações célula–célula/matriz extracelular (MEC), contribuindo para a formação de circuitos neurais e a organização dos tecidos. Alterações na expressão ou na função de Sema5a têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e do comportamento, e a desregulação da sinalização por semaforinas também é estudada em contextos de programas aberrantes de migração e invasão. Essas características tornam Sema5a um alvo útil para dissecar mecanismos de conectividade durante o desenvolvimento, conectividade sináptica e regulação, mediada por semaforinas, do movimento celular.
SEMA5A O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Sema5a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Sema5a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Sema5a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Sema5a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.