Selenoprotein W CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405939

概要

SELENOWは、筋肉および脳に豊富に発現する小型のセレン含有タンパク質であるセレノプロテインWをコードしており、セレノール依存的な抗酸化活性を介して細胞内のレドックス恒常性の維持に寄与します。SELENOWは、活性酸素種（ROS）バランスの調節、タンパク質チオール状態の維持、ならびに酸化・炎症条件下における細胞骨格の完全性とストレス適応の支持に関与するとされています。SELENOWに関連する過程は、グルタチオン依存性のレドックスネットワークや、ミトコンドリア機能および細胞生存プログラムに影響する、より広範なセレン生物学とも交差します。SELENOWの発現変化は、酸化ストレス、神経変性に関連する経路、ならびに代謝・炎症状態といった文脈で報告されており、レドックスシグナル伝達やストレス感受性の機構研究において重要性があります。

Selenoprotein W CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSELENOW遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SELENOW内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SELENOWのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Selenoprotein Wタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Selenoprotein Wシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SELENOW欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Selenoprotein Wの機能に不可欠なSELENOWエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SELENOWゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Selenoprotein W CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSelenoprotein W CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SELENOW遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Selenoprotein W HDRプラスミド（h）および Selenoprotein W HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSELENOWホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSELENOW標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。