Scn4b Double Nickaseプラスミド (h): sc-411001-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Scn4b Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Scn4bダブルニカースプラスミド（h）およびScn4bダブルニカースプラスミド（h2）は、SCN4Bを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Scn4b Double Nickaseプラスミド (h) | sc-411001-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Scn4b Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-411001-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SCN4Bは、電位依存性ナトリウムチャネルのβ4サブユニット（Scn4b）をコードしており、電位依存性ナトリウムチャネルのαサブユニットと会合する補助的な膜タンパク質である。これにより、チャネルのゲーティング、細胞表面での発現、ならびに興奮性に影響を与える。活動電位の発火調節にとどまらず、SCN4Bは細胞接着やシグナル伝達の制御とも関連づけられており、形質膜上での相互作用を介して細胞骨格の構成や膜マイクロドメインの組成に影響し得る。SCN4Bの発現変化やバリアントは、心臓および神経筋の表現型を含む、興奮性に関連した疾患や電気的シグナル伝達の異常という観点から研究されている。がん生物学の分野では、SCN4Bは細胞の遊走・浸潤プログラムの調節因子としても検討されており、上皮間葉転換（EMT）や転移挙動を規定する経路との関連で重要性がある。
Scn4b ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における SCN4B 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、SCN4B内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、SCN4Bの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、SCN4Bが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。