Scn4b Plasmide Double Nickase (h): sc-411001-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Scn4b Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Scn4b Double Nickase Plasmid (h) e il Scn4b Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SCN4B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Scn4b Plasmide Double Nickase (h) | sc-411001-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Scn4b Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411001-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SCN4B codifica la subunità β4 del canale del sodio (Scn4b), una proteina di membrana ausiliaria che si associa alle subunità α dei canali del sodio voltaggio-dipendenti influenzandone il gating, l’espressione sulla superficie cellulare e l’eccitabilità. Oltre a modulare la generazione dei potenziali d’azione, SCN4B è stata collegata anche alla regolazione dell’adesione cellulare e della segnalazione tramite interazioni a livello della membrana plasmatica, che possono incidere sull’organizzazione del citoscheletro e sulla composizione dei microdomini di membrana. Alterazioni dell’espressione di SCN4B o sue varianti sono studiate nel contesto di disturbi legati all’eccitabilità e di una segnalazione elettrica disfunzionale, inclusi fenotipi cardiaci e neuromuscolari. In biologia dei tumori, SCN4B è stata inoltre indagata come modulatore dei programmi di migrazione e invasione, rendendola rilevante per le vie che regolano la transizione epitelio–mesenchimale e il comportamento metastatico.
Scn4b Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SCN4B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SCN4B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SCN4B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SCN4B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.