Sclerostin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401527

개요

SOST는 주로 골세포(osteocyte)에서 생성되는 분비성 당단백질인 스클레로스틴(sclerostin)을 암호화하며, 뼈 형성의 핵심적인 음성 조절자로 작용합니다. 스클레로스틴은 LRP5/6 공동수용체에 결합해 정형적 Wnt/β-카테닌 신호전달을 억제함으로써 조골세포 분화, 골기질 침착, 골격 리모델링을 조절합니다. Wnt에 의해 구동되는 전사 프로그램을 통제함으로써 SOST는 조골세포–파골세포의 커플링과 무기질 항상성에도 영향을 미칩니다. SOST 활성이 비정상적으로 조절되면 골량이 변화하는 표현형과 연관되며, 골다공증 생물학, 골격 이형성증, 그리고 염증성·대사성 질환에서 관찰되는 골 리모델링 변화의 맥락에서 자주 연구됩니다.

Sclerostin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SOST 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SOST 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SOST의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Sclerostin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Sclerostin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SOST 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Sclerostin 기능에 중요한 SOST 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SOST 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Sclerostin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Sclerostin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SOST 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Sclerostin HDR 플라스미드 (h) 및 Sclerostin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SOST 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SOST 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.