SCD1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422809-NIC

O gene **Scd1** do camundongo codifica a **estearoil-CoA dessaturase 1 (SCD1)**, uma enzima localizada no retículo endoplasmático que introduz uma ligação dupla **cis** em acil-CoAs de ácidos graxos saturados para gerar ácidos graxos monoinsaturados, como **palmitoleato** e **oleato**. Ao controlar o equilíbrio entre lipídios saturados e monoinsaturados, a SCD1 regula a **lipogênese de novo**, a composição de fosfolipídios de membrana, a síntese de triglicerídeos e de ésteres de colesterol e a biogênese de gotículas lipídicas, com efeitos a jusante sobre as respostas ao estresse do RE e a sinalização metabólica. A atividade de **Scd1** se cruza com programas transcricionais de detecção de nutrientes, incluindo as vias de **SREBP1** e **PPAR**, moldando o armazenamento de energia celular e a homeostase redox. Alterações na expressão ou atividade de SCD1 têm sido associadas a fenótipos metabólicos envolvendo esteatose hepática e desregulação relacionada à obesidade, e o gene é frequentemente estudado em contextos de remodelação lipídica em estados proliferativos e inflamatórios.

SCD1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Scd1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Scd1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Scd1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Scd1 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.