ROS-GC1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404483

개요

GUCY2D는 구아닐레이트 사이클레이스 활성화 단백질이 전달하는 세포내 Ca2+ 신호에 반응해 cGMP를 합성하는 막 결합형 수용체 구아닐레이트 사이클레이스인 ROS-GC1을 암호화합니다. 망막 광수용체에서 ROS-GC1은 광변환 연쇄반응 내에서 순환 뉴클레오타이드 개폐 채널의 활성을 조절하는 cGMP 수준을 다시 회복시켜 회복과 적응을 돕습니다. 이 효소는 칼슘 항상성과 2차 전달자 신호를 통합해 막 흥분성과 시냅스 출력이 미세 조정되도록 합니다. GUCY2D의 조절 이상 또는 병원성 변이는 유전성 망막 질환과 연관되어 있어, cGMP 신호와 감각 뉴런 기능의 기전을 연구하는 데 중요한 표적입니다.

ROS-GC1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GUCY2D 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GUCY2D 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GUCY2D의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ROS-GC1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ROS-GC1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GUCY2D 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ROS-GC1 기능에 중요한 GUCY2D 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GUCY2D 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ROS-GC1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 ROS-GC1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GUCY2D 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ROS-GC1 HDR 플라스미드 (h) 및 ROS-GC1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GUCY2D 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GUCY2D 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.