RNF10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409761

概要

RNF10は、ユビキチン依存的なタンパク質の安定性制御およびシグナル伝達出力の調節に関与するとされる、RING型ジンクフィンガータンパク質をコードします。E3リガーゼに関連するプロセスを介して、RNF10は転写プログラムの制御、受容体媒介性シグナル伝達、ならびに細胞の増殖や分化に影響するプロテオスタシス経路の調節と関連づけられてきました。RNF10の発現や制御の変化は、神経系および心血管系の生物学に関わる状況で報告されており、疾患における細胞恒常性の破綻への寄与の可能性について研究されています。そのためRNF10は、ユビキチン介在性のシグナルネットワーク再編が遺伝子発現や細胞運命決定にどのように影響するかを解明する上で重要な研究対象です。

RNF10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRNF10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RNF10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RNF10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RNF10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RNF10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RNF10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RNF10の機能に不可欠なRNF10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RNF10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RNF10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRNF10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RNF10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RNF10 HDRプラスミド（h）および RNF10 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRNF10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRNF10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。