RIM-BP2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406740

개요

RIMBP2는 RIM 단백질 및 기타 시냅스 구성요소와의 상호작용을 통해 전압개폐성 Ca2+ 채널을 신경전달물질 방출 기계와 연결해 주는 시냅스 전 활성대(active zone) 스캐폴드 단백질인 RIM-BP2를 암호화합니다. RIM-BP2는 Ca2+ 유입을 시냅스 소포의 도킹(docking)과 프라이밍(priming) 과정과 조직화함으로써, 흥분성 시냅스에서 활동전위에 의해 유발되는 효율적인 엑소사이토시스와 단기 시냅스 가소성을 지원합니다. 또한 이 단백질은 전시냅스 말단에서 Ca2+ 의존적 신호전달에 관여하며, 시냅스 강도를 형성하는 소포 순환(vesicle cycling) 역학에도 영향을 미칩니다. RIMBP2의 유전적 교란은 신경발달 및 신경정신질환 관련 표현형과 연관된 바 있어, 시냅스 전달 결함과 회로 수준의 기능 이상을 연구하는 데 중요한 표적입니다.

RIM-BP2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 RIMBP2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 RIMBP2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 RIMBP2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 RIM-BP2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 RIM-BP2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 RIMBP2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• RIM-BP2 기능에 중요한 RIMBP2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 RIMBP2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• RIM-BP2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 RIM-BP2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 RIMBP2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  RIM-BP2 HDR 플라스미드 (h) 및 RIM-BP2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 RIMBP2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 RIMBP2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.