Ribosomal Protein L26 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406835

Descripción general

RPL26 codifica la proteína ribosomal L26, un componente estructural de la subunidad ribosomal grande 60S que contribuye al ensamblaje del ribosoma y a la traducción eficiente de ARNm citosólicos. Más allá de su función central en la síntesis de proteínas, RPL26 se ha relacionado con la regulación de programas de traducción sensibles al estrés, incluida la modulación de la señalización de la vía de p53 mediante efectos sobre la traducción de transcritos clave. La alteración de la homeostasis de las proteínas ribosomales puede desencadenar respuestas de estrés ribosomal y modificar el control del ciclo celular, lo que respalda la investigación de RPL26 en contextos como la estabilidad genómica, la apoptosis y el control translacional alterado en el cáncer y otros trastornos proliferativos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein L26 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RPL26 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RPL26 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RPL26 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ribosomal Protein L26.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RPL26 para la investigación de la señalización de Ribosomal Protein L26, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RPL26 críticos para la función de Ribosomal Protein L26
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RPL26 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Ribosomal Protein L26 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Ribosomal Protein L26 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RPL26. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ribosomal Protein L26 (h) y el plásmido HDR Ribosomal Protein L26 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RPL26 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RPL26 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.