Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RhoA Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400052-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RhoAO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RhoA (h) e o Plasmídeo Double Nickase RhoA (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RHOA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RhoA Anticorpo (26C4): sc-418
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RhoA Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400052-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RhoA Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400052-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RHOA codifica a pequena GTPase RhoA, um regulador central da dinâmica do citoesqueleto de actina, da forma celular e da contratilidade, por meio da alternância entre os estados ligados a GDP e a GTP. A RhoA ativa sinaliza de forma proeminente por meio dos efetores ROCK e mDia para controlar a formação de fibras de estresse, a renovação de adesões focais, a citocinese e a mecanotransdução, com integração mais ampla em vias dependentes de GPCR e de integrinas. A atividade de RhoA influencia a migração celular, a função de barreira epitelial e respostas transcricionais ligadas à tensão do citoesqueleto. Sinalização de RHOA desregulada e mutações recorrentes foram relatadas em múltiplos tipos de câncer e também estão implicadas no remodelamento cardiovascular e em processos do neurodesenvolvimento, sustentando sua relevância em redes de sinalização associadas a doenças.
RhoA O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RHOA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RHOA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RHOA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RHOA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.