Rent2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-435860-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rent2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rent2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Rent2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Upf2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rent2 Anticorpo (G-10): sc-374230
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rent2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-435860-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rent2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-435860-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O Upf2 (Rent2) de camundongo codifica um fator essencial de vigilância de RNA necessário para a degradação de mRNA mediada por nonsense (NMD), uma via que detecta e degrada transcritos contendo códons de terminação prematuros para manter a fidelidade do proteoma. O RENT2 atua em conjunto com componentes centrais do NMD, como UPF1 e UPF3, e acopla a terminação da tradução à remodelação de mRNPs, influenciando a estabilidade do mRNA, os desfechos de splicing alternativo e a regulação do transcriptoma em resposta ao estresse. A atividade de Upf2 afeta o desenvolvimento neuronal, a homeostase imune e a integridade da linhagem germinativa, e a desregulação do NMD tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento, ao amortecimento de transcritos relevantes para o câncer e a respostas alteradas ao estresse genotóxico ou proteotóxico. A perturbação experimental de Upf2 é amplamente utilizada para investigar o controle de qualidade de RNA, a vigilância translacional e a robustez da expressão gênica em células de mamíferos.
Rent2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Upf2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Upf2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Upf2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Upf2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.