Relaxin 3 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-431778-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Relaxin 3O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Relaxin 3 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Relaxin 3 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Rln3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Relaxin 3 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-431778-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Relaxin 3 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-431778-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Rln3 de camundongo codifica a relaxina 3, um neuropeptídeo secretado da superfamília insulina/relaxina que sinaliza principalmente por meio do GPCR RXFP3 (e, dependendo do contexto, também RXFP1/RXFP4) para regular a excitabilidade neuronal e a integração neuroendócrina. A relaxina 3 é enriquecida em circuitos do tronco encefálico e do hipotálamo e influencia o comportamento alimentar, a vigília/alerta, a responsividade ao estresse e a saída autonômica por meio de vias de GPCR acopladas a cAMP/PKA e de programas transcricionais a jusante. Alterações na sinalização de relaxina 3 têm sido investigadas em modelos de desregulação metabólica, fenótipos relacionados à ansiedade e ao estresse e distúrbios do ciclo sono–vigília, nos quais a modulação em nível de circuitos afeta o balanço energético e o estado comportamental. Como resultado, Rln3 serve como um ponto de entrada molecular útil para estudar a sinalização neuromoduladora por peptídeos e a função de redes hipotalâmicas em sistemas de camundongo.
Relaxin 3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Rln3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Rln3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Rln3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Rln3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.