REEP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-427671

概要

Reep6 は、受容体発現増強タンパク質6（REEP6）をコードしており、管状小胞体の形態形成や、初期分泌経路におけるタンパク質輸送の調整に関与するとされる REEP ファミリーの一員です。マウス細胞では、REEP6 は膜の曲率形成や、膜貫通タンパク質の効率的な処理・輸送を支える小胞体サブドメインの構築に関与し、その下流で細胞恒常性やストレス応答にも影響を及ぼします。REEP ファミリータンパク質は、特殊化した膜区画の維持やプロテオスタシスに関わる過程と関連づけられているため、REEP6 は神経・感覚生物学の研究においても重要性が高いと考えられます。REEP タンパク質が関与する小胞体構造や輸送経路の破綻は、神経変性や感覚系機能障害の文脈でしばしば検討されており、関連モデルにおける機序解明研究を支えています。

REEP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるReep6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Reep6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Reep6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、REEP6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、REEP6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Reep6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• REEP6の機能に不可欠なReep6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Reep6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• REEP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびREEP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Reep6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  REEP6 HDRプラスミド（m）および REEP6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはReep6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のReep6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。