Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rad51C Plasmide Double Nickase (h): sc-403060-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Rad51C Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Rad51C Double Nickase Plasmid (h) e il Rad51C Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RAD51C. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Rad51C Antibody (2H11): sc-56214
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Rad51C Plasmide Double Nickase (h) | sc-403060-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rad51C Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403060-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAD51C codifica Rad51C, un paralogo di RAD51 che opera nella ricombinazione omologa e nella rete di riparazione del DNA Fanconi anemia–BRCA per risolvere le rotture a doppio filamento del DNA e i crosslink interfilamento. Rad51C partecipa alla dinamica dei filamenti di RAD51 e all’elaborazione delle giunzioni di Holliday, sostenendo la stabilità della forcella di replicazione e l’integrità del genoma durante le fasi S/G2. L’alterazione di RAD51C è associata a risposte al danno del DNA difettose, instabilità cromosomica e maggiore sensibilità allo stress genotossico, rendendolo un nodo chiave nelle vie che regolano la tolleranza allo stress replicativo. Queste proprietà collegano RAD51C ai meccanismi alla base della predisposizione ereditaria al cancro e dei disturbi correlati alla riparazione del DNA, supportandone l’impiego nello studio dei fenotipi di mantenimento del genoma.
Rad51C Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RAD51C nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RAD51C. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RAD51C. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RAD51C interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.