RACK7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411774

概要

ZMYND8（RACK7）は、PHD–ブロモドメイン–PWWPからなるモジュールを介してアセチル化およびメチル化ヒストンに結合し、転写調節を協調的に制御するクロマチンリーダータンパク質をコードしています。RACK7はクロマチンリモデリングやDNA損傷応答プログラムに関与し、ヒストン修飾からのシグナルを統合してエンハンサー活性やRNAポリメラーゼII依存的転写を調節します。また、コリプレッサー複合体やリモデリング複合体との相互作用を通じて、上皮間葉転換（EMT）の制御、低酸素関連の転写ネットワーク、炎症関連遺伝子発現の制御に関与することが示されています。ZMYND8に関連するクロマチン経路の機能不全は、ゲノム安定性や転写制御の異常を特徴とするがんを含む各種疾患で報告されています。

RACK7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるZMYND8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ZMYND8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ZMYND8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RACK7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RACK7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ZMYND8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RACK7の機能に不可欠なZMYND8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ZMYND8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RACK7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRACK7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ZMYND8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RACK7 HDRプラスミド（h）および RACK7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZMYND8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZMYND8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。