Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rab 7L1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403366
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rab 7L1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Rab 7L1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rab 7L1 Anticorpo (D-8): sc-398274
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rab 7L1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403366 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RAB29 codifica a Rab 7L1, uma pequena GTPase da família Rab que regula o tráfego de membranas, com funções de destaque na rede trans-Golgi e nas interfaces endossomais. A Rab 7L1 participa do brotamento de vesículas, da triagem de cargas e de vias de reciclagem que moldam a homeostase relacionada a lisossomos e o posicionamento de organelos, por meio de interações coordenadas e dependentes de GTP com proteínas efetoras. Em células humanas, o RAB29 tem sido associado a processos relevantes para a biologia de neurônios e de células imunes, incluindo vias envolvendo a dinâmica vesicular associada à LRRK2 e o tráfego responsivo ao estresse. Assim, a perturbação da função de Rab 7L1 é estudada no contexto de alterações no transporte endolisossomal, na renovação de proteínas e em saídas de sinalização implicadas em mecanismos relacionados à neurodegeneração.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Rab 7L1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RAB29 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RAB29, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RAB29 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Rab 7L1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RAB29 para a investigação da sinalização de Rab 7L1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RAB29 críticos para a função Rab 7L1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RAB29 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Rab 7L1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Rab 7L1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RAB29. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Rab 7L1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Rab 7L1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RAB29 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RAB29 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.