Plásmido Doble Nickase (h) QTRT1: sc-413456-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)QTRT1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa QTRT1 (h) y el plásmido de doble nickasa QTRT1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a QTRT1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: QTRT1 Anticuerpo (D-7): sc-398918
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) QTRT1 | sc-413456-NIC | 20 µg | $410.00 |
QTRT1 codifica la subunidad catalítica de la transglicosilasa tRNA-guanina, que incorpora queuosina en la posición “wobble” (G34) de determinados ARNt citosólicos, modulando así la fidelidad de la decodificación de codones y la dinámica de la traducción. A través de esta vía de modificación del ARNt, QTRT1 contribuye a la proteostasis y a la adaptación al estrés celular al influir en la precisión y la eficiencia de la síntesis proteica. La desregulación de enzimas de modificación del ARNt, incluida QTRT1, se ha asociado con programas de traducción alterados vinculados a fenotipos de proliferación y respuesta al estrés, lo que convierte a este gen en un elemento relevante para estudios de biología del ARN y regulación metabólica. Por ello, QTRT1 es un objetivo útil para investigar de manera mecanística cómo las modificaciones de bases en la posición wobble afectan la expresión génica a nivel de la traducción.
QTRT1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus QTRT1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de QTRT1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de QTRT1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con QTRT1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.