PTP22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-416917

概要

PTPN22は、免疫細胞における抗原受容体シグナル伝達の主要な負の制御因子である細胞質タンパク質チロシンホスファターゼPTP22（LYPとも呼ばれる）をコードします。PTP22は、T細胞受容体および関連経路の下流にあるシグナル伝達中間体を脱リン酸化することで、リンパ球の活性化、サイトカイン産生、免疫寛容の成立に必要な閾値を調節します。PTPN22の遺伝的変異や活性の変化は、複数の自己免疫疾患および炎症性疾患への感受性と強く関連しており、免疫受容体シグナル伝達ネットワークにおいて広く研究されている重要な要素です。機能解析では、PTP22は近位のキナーゼ／ホスファターゼのバランスを制御する経路、NFAT/NF-κB依存的な転写プログラム、ならびに免疫細胞分化を制御する経路と関連づけられることが多いです。

PTP22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPTPN22遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PTPN22内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PTPN22のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PTP22タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PTP22シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PTPN22欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PTP22の機能に不可欠なPTPN22エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PTPN22ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PTP22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPTP22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PTPN22遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PTP22 HDRプラスミド（h）および PTP22 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPTPN22ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPTPN22標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。