Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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PSD-95 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400830
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PSD-95 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PSD-95, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PSD-95 Anticorpo (7E3): sc-32290
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PSD-95 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400830 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DLG4 codifica a PSD-95, um elemento central de ancoragem da densidade pós-sináptica que organiza sinapses glutamatérgicas ao ancorar e agrupar complexos de receptores NMDA e AMPA e acoplá-los à sinalização a jusante. Por meio de seus domínios PDZ, SH3 e GK, a PSD-95 coordena o tráfego de receptores sinápticos, a plasticidade dependente de atividade e a remodelação do citoesqueleto, integrando vias que regulam a neurotransmissão excitatória e a maturação de espinhas dendríticas. Alterações na função e na localização sináptica de DLG4/PSD-95 têm sido implicadas em fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, refletindo seu papel na formação de circuitos e no equilíbrio entre excitação e inibição. Como proteína hub, a PSD-95 é frequentemente estudada em mecanismos de aprendizagem e memória, escalonamento sináptico e proteostase em sinapses neuronais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PSD-95 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DLG4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DLG4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DLG4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PSD-95.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DLG4 para a investigação da sinalização de PSD-95, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DLG4 críticos para a função PSD-95
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DLG4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PSD-95 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PSD-95 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DLG4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PSD-95 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PSD-95 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DLG4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DLG4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.