PRX IV Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402821-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PRX IVO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PRX IV (h) e o Plasmídeo Double Nickase PRX IV (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PRDX4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PRX IV Anticorpo (F-2): sc-376668
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PRX IV Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402821-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PRX IV Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402821-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O PRDX4 humano codifica a peroxirredoxina IV (PRX IV), uma peroxidase dependente de tiol do retículo endoplasmático e da via secretória que reduz o peróxido de hidrogénio e peróxidos lipídicos para manter a homeostase redox. Ao acoplar a detoxificação de peróxidos à formação de pontes dissulfureto, a PRX IV apoia a dobragem oxidativa de proteínas, a proteostase do RE e a atenuação da sinalização da resposta a proteínas mal dobradas (UPR) sob stresse oxidativo. A atividade do PRDX4 cruza-se com vias reguladas por redox que controlam a secreção, a inflamação e a sobrevivência celular, e alterações na expressão ou no estado de oxidação têm sido associadas a fenótipos de stresse oxidativo descritos na biologia do cancro, na disfunção metabólica e em contextos cardiovasculares e inflamatórios. Como enzima redox secretada/do RE, a PRX IV é frequentemente estudada pelo seu impacto no tamponamento de ERO (espécies reativas de oxigénio) no meio extracelular e no lúmen, e pela modulação subsequente de programas transcricionais adaptativos ao stresse.
PRX IV O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PRDX4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PRDX4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PRDX4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PRDX4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.