PPP1R12C Lentiviral Activation Particles (h): sc-412332-LAC

PPP1R12Cは、ミオシンホスファターゼ標的サブユニット3（MYPT3）をコードしており、細胞骨格基質に対してPP1（プロテインホスファターゼ1）の触媒活性を指向させるのに寄与する、PP1の制御因子です。PPP1R12Cは、ミオシン軽鎖および関連するアクトミオシン制御因子のリン酸化状態を調節することで、細胞の収縮性、接着ダイナミクス、運動性に関与し、RhoA/ROCKをはじめとするキナーゼ経路からのシグナル入力を統合します。PP1の標的化やミオシンホスファターゼ機能が変化すると、細胞骨格の再構築やメカノトランスダクションが攪乱され得ますが、これらの過程は腫瘍細胞の浸潤、線維化に伴うリモデリング、血管平滑筋機能障害などにしばしば関与します。そのため、PPP1R12Cの発現およびリン酸化依存的な制御は、ストレスファイバーの構築、細胞形状の制御、収縮性表現型を調整するシグナル間クロストークの研究において重要です。

PPP1R12C レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なPPP1R12Cの発現上昇を可能にします。

PPP1R12C レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、PPP1R12C転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性PPP1R12Cの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のPPP1R12Cゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。