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Polycystin-2双切口酶质粒(h) | sc-400669-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Polycystin-2双切口酶质粒(h2) | sc-400669-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PKD2 编码多囊蛋白-2(polycystin-2),这是一种对 Ca2+ 具有通透性的 TRP 样离子通道,定位于初级纤毛、内质网及其他膜性细胞区室,用于调控细胞内钙信号传导。多囊蛋白-2 将机械感受与化学感受输入与调控上皮细胞极性、管道发生以及液体流动感知的通路相协调,并在纤毛信号网络中与多囊蛋白-1 形成功能性互作。通过调节钙依赖性的转录与代谢程序,PKD2 影响细胞周期进程、平面细胞极性以及细胞外基质重塑。PKD2 的失调与囊肿发生密切相关,并参与常染色体显性多囊肾病及相关肝肾表型的发病生物学过程。
Polycystin-2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PKD2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PKD2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PKD2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PKD2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。