PNP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404914

개요

퓨린 뉴클레오사이드 포스포릴레이스(PNP)는 퓨린 구제(salvage) 경로에 속하는 세포질 효소로, 이노신과 구아노신 뉴클레오사이드를 인산분해하여 하이폭산틴 또는 구아닌을 생성함으로써 뉴클레오타이드 항상성과 재활용을 뒷받침합니다. 퓨린 대사물의 균형을 조절함으로써 PNP는 세포의 에너지 상태, 산화환원 환경, 그리고 DNA/RNA 전구체의 가용성에 영향을 미치며, 그 결과 증식과 스트레스 반응에도 하위 단계의 영향을 줍니다. PNP 활성은 특히 면역세포 대사에서 중요하며, 퓨린 플럭스는 림프구의 생존과 기능을 조절합니다. PNP의 조절 이상 또는 유전성 결핍은 면역결핍 양상과 퓨린 대사물 축적의 변화를 동반하는 것으로 알려져 있어, 대사 연계 세포 운명 결정의 기전 연구에서 중요한 표적이 됩니다.

PNP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PNP 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PNP 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PNP의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PNP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PNP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PNP 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PNP 기능에 중요한 PNP 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PNP 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PNP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PNP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PNP 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PNP HDR 플라스미드 (h) 및 PNP HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PNP 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PNP 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.