PMCA4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402888-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PMCA4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PMCA4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PMCA4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATP2B4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PMCA4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402888-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PMCA4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402888-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP2B4 codifica a Ca2+-ATPase 4 da membrana plasmática (PMCA4), uma ATPase do tipo P que extrude Ca2+ do citosol para manter a homeostase do cálcio e modular a amplitude e a duração da sinalização dependente de Ca2+. A PMCA4 regula microdomínios localizados de Ca2+ que influenciam processos como o acoplamento excitação–contração, a sinalização de óxido nítrico e programas de transcrição dependentes de Ca2+. Ao controlar a remoção de Ca2+ na membrana plasmática, a PMCA4 interage com vias que incluem a regulação dependente de calmodulina e redes a jusante de quinases/fosfatases que ajustam a motilidade celular, a secreção e a proliferação. Variações genéticas ou alterações na expressão de ATP2B4 têm sido associadas a fenótipos ligados à biologia dos eritrócitos e à função vascular, reforçando a sua relevância em estudos mecanísticos da fisiologia celular impulsionada pelo cálcio.
PMCA4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATP2B4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATP2B4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATP2B4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATP2B4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.