Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PLAP Antibody (HD 11F7): sc-53414. Western blot analysis of PLAP expression in non-transfected: sc-117752 (A) and human PLAP transfected: sc-113546 (B) 293T whole cell lysates.
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PLAP双切口酶质粒(h): sc-400629-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PLAP 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PLAP双切酶质粒（h）和PLAP双切酶质粒（h2）编码针对ALPP的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PLAP: sc-47691，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PLAP双切口酶质粒(h) | sc-400629-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PLAP双切口酶质粒(h2) | sc-400629-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 ALPP 基因编码胎盘碱性磷酸酶（PLAP）。PLAP 是一种通过糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚定在细胞表面的外酶，可水解磷酸单酯，并影响细胞外核苷酸与磷酸盐的可用性。PLAP 活性与膜微区（microdomain）的组织状态相关，并参与质膜层面的细胞分化、黏附与信号传导等过程。ALPP 在生理上主要在胎盘组织中高表达，同时也常作为分子标志物用于研究在转化细胞及与生殖细胞相关背景中出现的异位表达与谱系状态变化。ALPP/PLAP 表达模式的改变常被用来探究与发育调控、膜运输以及细胞状态转换相关的通路。
PLAP 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ALPP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ALPP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ALPP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ALPP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。