PiT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422988-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PiT1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PiT1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase PiT1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Slc20a1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PiT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422988-NIC | 20 µg | $410.00 |
O Slc20a1 de camundongo codifica o transportador de fosfato dependente de sódio do tipo III PiT1, uma proteína de membrana amplamente expressa que medeia a captação de fosfato inorgânico para sustentar a síntese de nucleotídeos, o metabolismo de fosfolipídios e a bioenergética celular. O PiT1 integra a disponibilidade de fosfato com a progressão do ciclo celular e a sinalização de sobrevivência, e tem sido associado ao controle da proliferação e a respostas ao estresse em múltiplos tipos celulares. Além da homeostase do fosfato, o PiT1 contribui para processos relacionados à mineralização e para redes de sinalização impulsionadas por fosfato que se cruzam com vias metabólicas e de desenvolvimento. A desregulação do transporte de fosfato e de vias associadas ao PiT1 é relevante para estudos de biologia da calcificação, remodelamento metabólico e fenótipos proliferativos em sistemas modelo pertinentes a doenças.
PiT1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Slc20a1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Slc20a1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Slc20a1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Slc20a1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.