PHF5A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407986-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PHF5AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PHF5A (h) e o Plasmídeo Double Nickase PHF5A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PHF5A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PHF5A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407986-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PHF5A Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407986-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PHF5A (proteína de dedo PHD 5A) é um componente evolutivamente conservado do subcomplexo SF3b do snRNP U2, atuando como um adaptador essencial no splicing de pré‑mRNA e no reconhecimento de sítios de splicing durante as etapas iniciais da montagem do espliceossomo. Ao estabilizar interações na região do ponto de ramificação, o PHF5A favorece a remoção precisa de íntrons e influencia programas de splicing alternativo que moldam a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA e estados de diferenciação. A desregulação da função do espliceossomo e as dependências de fatores de splicing são características recorrentes em sistemas celulares proliferativos e adaptados ao estresse, tornando o PHF5A um nó útil para investigar o controle do processamento de RNA. A perturbação de PHF5A tem sido associada a alterações no balanço de isoformas de transcritos e ao remodelamento de vias a jusante, relevantes para modelos de instabilidade genômica e sinalização oncogênica.
PHF5A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PHF5A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PHF5A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PHF5A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PHF5A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.