PHF5A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407986

개요

PHF5A(PHD 핑거 단백질 5A)는 U2 snRNP 내 SF3b 서브복합체의 필수 구성 요소로서, 분기점 서열(branch point sequence) 인식을 지원하고 pre-mRNA 스플라이싱 과정에서 스플라이스 부위 선택(splice site choice)을 결정하는 데 기여합니다. 스플라이소좀 조립과 스플라이소좀 동역학에서의 역할을 통해 PHF5A는 전사체 아이소폼 다양성에 영향을 미치며, 세포주기 진행과 유전체 유지에 연관된 효율적인 유전자 발현 프로그램을 보장합니다. PHF5A 기능이 교란되면 비정상적인 엑손 사용 및 인트론 보존(intron retention)을 포함한 광범위한 스플라이싱 결함을 유발할 수 있으며, 그 결과 단백질 항상성(proteostasis)과 스트레스 반응 경로가 재편될 수 있습니다. PHF5A를 포함한 스플라이소좀 구성 요소의 이상 조절은 RNA 처리와 전사 적응의 변화가 특징인 암 및 기타 질환의 맥락에서 자주 연구됩니다.

PHF5A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PHF5A 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PHF5A 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PHF5A의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PHF5A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PHF5A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PHF5A 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PHF5A 기능에 중요한 PHF5A 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PHF5A 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PHF5A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PHF5A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PHF5A 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PHF5A HDR 플라스미드 (h) 및 PHF5A HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PHF5A 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PHF5A 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.