PHF14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411313

概要

PHF14（PHDフィンガータンパク質14）は、ヒストン修飾を認識してエピジェネティック状態の調整に関与し、転写制御に影響を及ぼすクロマチン関連制御因子をコードします。細胞分化プログラムの制御、細胞周期の進行、ならびに細胞骨格の構築や発生シグナル伝達を形作る遺伝子発現ネットワークの調節に関与することが示されています。クロマチンのアクセス性を調節することで、PHF14は系譜決定や組織恒常性に関わる経路に影響し、がんや発生異常でみられる異常な転写制御とも関連します。PHF14に関する研究は、増殖や遊走の変化、状況依存的な遺伝子発現といった、クロマチン駆動性の表現型を解析するための結節点（ノード）としての有用性を支持しています。

PHF14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPHF14遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PHF14内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PHF14のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PHF14タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PHF14シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PHF14欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PHF14の機能に不可欠なPHF14エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PHF14ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PHF14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPHF14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PHF14遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PHF14 HDRプラスミド（h）および PHF14 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPHF14ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPHF14標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。