Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Perilipin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401305
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Perilipin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Perilipin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Perilipin Anticorpo (G-2): sc-390169
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Perilipin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401305 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PLIN1 codifica a perilipina-1, uma fosfoproteína associada a gotículas lipídicas que regula o armazenamento de triglicerídeos e a lipólise em adipócitos ao controlar o acesso das lipases à superfície da gotícula. A perilipina integra eventos de fosforilação dependentes de cAMP/PKA com a mobilização de lipídios no tecido adiposo, coordenando interações com cofatores como ABHD5/CGI-58 e com enzimas incluindo ATGL e HSL. Por meio do seu papel na biogênese e na renovação das gotículas lipídicas, PLIN1 influencia a homeostase energética celular, o fluxo de ácidos graxos e a sinalização metabólica ligada a adipocinas. Alterações genéticas e funcionais em PLIN1 têm sido associadas à disfunção do tecido adiposo humano, incluindo fenótipos de lipodistrofia e desregulação metabólica, tornando-o um alvo útil para estudar o manejo de lipídios em modelos celulares relevantes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Perilipin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PLIN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PLIN1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PLIN1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Perilipin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PLIN1 para a investigação da sinalização de Perilipin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PLIN1 críticos para a função Perilipin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PLIN1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Perilipin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Perilipin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PLIN1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Perilipin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Perilipin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PLIN1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PLIN1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.