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Peg10慢病毒激活颗粒(m) | sc-431278-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Peg10(父源表达基因10)编码一种由驯化的逆转座子衍生、类似 Gag/Pol 的蛋白。该基因具有基因组印记特性,并且对胎盘发育和滋养层细胞分化至关重要。PEG10 参与 RNA 结合及蛋白–蛋白相互作用网络,影响细胞存活、增殖与谱系程序;同时也与调控上皮–间质转化、泛素介导的蛋白周转以及自噬相关过程的通路有关。多种癌症背景及组织重塑状态中均报道有 PEG10 表达失调,使其成为研究生长控制与应激适应性转录程序的一个重要节点。在小鼠模型中,Peg10 常用于探究发育相关基因调控、印记生物学以及对致癌信号依赖性的作用。
Peg10 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Peg10 表达。
Peg10 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Peg10转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Peg10表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Peg10 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。